लिपिड बूंदें प्रतिदीप्ति परख किट

 

प्रोडक्ट का नाम	बिल्ली। नहीं।	विशेष.
लिपिड बूंदें प्रतिदीप्ति परख किट	G1905-100T	100 T

 

 

लिपिड बूंदें कोशिकाओं में विशेष लिपिड भंडारण अंग हैं, जो कोशिकाओं में तटस्थ लिपिड के भंडारण और हाइड्रोलिसिस को नियंत्रित कर सकते हैं और कोशिकाओं के लिए गतिशील ऊर्जा संतुलन प्रदान कर सकते हैं। इसके अलावा, लिपिड बूंदें साइटोस्केलेटन के साथ आगे बढ़ने और अन्य अंगों के साथ बातचीत करने में सक्षम होती हैं, जो सिग्नल ट्रांसडक्शन के नियमन में महत्वपूर्ण भूमिका निभाती हैं। सेलुलर लिपिड बूंदों का असामान्य संचय कई प्रकार के चयापचय रोगों में होता है, जैसे मोटापा, फैटी लीवर, हृदय रोग और रोग संबंधी स्थितियां।

लिपिड ड्रॉपलेट प्रतिदीप्ति परख किट BODIPY 493/503 पर आधारित है, जो एक लिपोफिलिक फ्लोरोसेंट जांच है जो ध्रुवीय लिपिड को स्थानीयकृत करने में सक्षम है, और इसका उपयोग कोशिकाओं और ऊतकों की तटस्थ लिपिड सामग्री को जांचने के लिए किया जा सकता है। इस किट को हमारे द्वारा अनुकूलित और डीबग किया गया है आर एंड डी टीम, और इसके कई फायदे हैं जैसे उपयोग में आसान, स्थिर प्रदर्शन और अच्छी प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्यता आदि। इंट्रासेल्युलर लिपिड सामग्री जितनी अधिक होगी, तीव्रता उतनी ही मजबूत होगी प्रतिदीप्ति उत्पन्न होती है, जिसे प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी और प्रवाह साइटोमीटर द्वारा पता लगाया जा सकता है। इसके अलावा, यह किट ट्राइग्लिसराइड संश्लेषण और भंडारण के प्रेरक के रूप में ओलिक एसिड भी प्रदान करती है, जिसका उपयोग सकारात्मक नियंत्रण प्रेरण के लिए किया जा सकता है।

 

 

सूखी बर्फ के साथ जहाज; 6 महीने तक प्रकाश से -20 डिग्री दूर रखें।

 

 

घटक संख्या	अवयव	G1904-100T
G1905-1	लिपिड छोटी बूंद परख जांच (2 मिमी)	100 μL
G1905-2	लिपिड ड्रॉपलेट परख बफर	100 एमएल
G1905-3	सकारात्मक प्रेरक (500 मिमी)	50 μL
नियमावली		1 पीसी

 

नोट: उपरोक्त प्रतिक्रिया समय को 6-वेल प्लेट सिस्टम के लिए जांचा जाता है।

 

 

नोट: उदाहरण के तौर पर वेल प्लेट एडहेण्ट सेल्स को लें, हर बार तरल बदलने पर सस्पेंशन सेल्स को सेंट्रीफ्यूज करने की आवश्यकता होती है; ऊतक के नमूने सीधे धुंधलापन और लेबलिंग चरणों को संदर्भित करते हैं, और उपयोग किए गए अभिकर्मकों की कुल मात्रा को स्थिति के अनुसार समायोजित किया जाता है; यदि आवश्यक हो, तो नमूने पहले से तय किए जा सकते हैं, लेकिन कृपया नमूनों में छिद्र होने से बचें।

1. लिपिड छोटी बूंद परख के लिए कार्यशील समाधान की तैयारी और लिपिड छोटी बूंद प्रेरण के लिए कार्यशील समाधान की तैयारी:

1.1. उचित मात्रा में लिपिड ड्रॉपलेट परख जांच (2 एमएम) और लिपिड ड्रॉपलेट परख बफर लें, 1: 500-2000 के अनुपात में अच्छी तरह मिलाएं, और लिपिड ड्रॉपलेट परख के लिए एक कार्यशील समाधान तैयार करें;

1.2. उचित मात्रा में पॉजिटिव इंड्यूसर (500 एमएम) लें और संबंधित परीक्षण कोशिकाओं के सेल कल्चर माध्यम का उपयोग इसे 400-1000 यूएम तक पतला करने के लिए करें, और अतिरिक्त उपयोग के लिए एक लिपिड ड्रॉपलेट इंडक्शन वर्किंग सॉल्यूशन तैयार करें (यह एकाग्रता एक संदर्भ है) सीमा, और कोशिकाओं की प्रकृति या अन्य परिस्थितियों के अनुसार उचित रूप से समायोजित की जा सकती है)।

2. सकारात्मक नियंत्रण समूह और दवा और अन्य उपचार (अच्छी तरह से प्लेट अनुवर्ती कोशिकाएं, उदाहरण के लिए, निलंबन कोशिकाएं हर बार तरल के परिवर्तन पर, कृपया सेंट्रीफ्यूजेशन करें):

2.1. कोशिकाओं को आवश्यकतानुसार पहले से ही वेल प्लेटों में प्रत्यारोपित किया जाता है (परख और उपकरण के आधार पर क्रॉलर के साथ या उसके बिना);

2.2. मूल सेल कल्चर माध्यम को हटा दें और पीबीएस या अन्य बफ़र्स से दो बार धोएं;

2.2.1. प्रायोगिक समूह: परीक्षण की जाने वाली कोशिकाओं को दवा उत्तेजना या अन्य प्रासंगिक उपचारों के अधीन किया जाता है, और वांछित ऊष्मायन समय आपके द्वारा निर्धारित किया जाता है;

2.2.2. सकारात्मक नियंत्रण समूह: लिपिड ड्रॉपलेट इंडक्शन वर्किंग सॉल्यूशन का 1 एमएल वेल प्लेट में जोड़ा जाता है, जिसे रात भर इनक्यूबेशन के लिए इनक्यूबेटर में रखा जाता है;

2.3. ऊष्मायन के अंत में, दाग लेबलिंग के लिए चरण 3 की ओर मुड़ें।

3. लिपिड बूंद धुंधला मार्कर:

3.1. सेलोजेनिक माध्यम को हटा दें और पीबीएस या अन्य बफ़र्स से 2-3 बार धोएं;

3.2. वॉश बफ़र निकालें, 1 एमएल लिपिड ड्रॉपलेट एस्से वर्किंग सॉल्यूशन डालें और हल्के झटकों के साथ मिलाएं;

3.3. प्रकाश से संरक्षित CO2 इनक्यूबेटर में 15 मिनट तक इनक्यूबेट करें;

3.4. ऊष्मायन के बाद, इसे पीबीएस या अन्य बफ़र्स के साथ दो बार धोएं, और इसे नाभिक और अन्य परिचालनों के साथ आगे दागा जा सकता है या प्रयोगात्मक आवश्यकताओं के अनुसार उपयुक्त उपकरण के साथ पता लगाया जा सकता है;

4. लिपिड बूंद का पता लगाना:

4.1. 3.4 में ऊष्मायन और धुलाई के बाद नमूने का उचित विधि और उपकरण का उपयोग करके विश्लेषण किया जाता है, हरे रंग की प्रतिदीप्ति, ईएक्स/ईएम 493/503 एनएम दिखाने के लिए लेबल किया जाता है, और उपकरण पहचान के कुछ उदाहरण नीचे दिए गए हैं;

4.1.1. सीधे या एंटी-फ्लोरेसेंस शमन सीलिंग समाधान (आइटम नंबर जी1401) के साथ, फिल्म को सील कर दिया जाता है और फिर पता लगाने और विश्लेषण के लिए एक फ्लोरोसेंस माइक्रोस्कोप के नीचे रखा जाता है।

4.1.2. ट्राइप्टिक डाइजेस्ट (निलंबन कोशिकाओं का उपयोग नहीं किया जाता है) का उपयोग करके पाचन और पुनर्निलंबन के बाद, फ्लो साइटोमेट्री का उपयोग करके कोशिकाओं का पता लगाया जाता है और उनका विश्लेषण किया जाता है।

 

 

1. कोशिकाओं के विभिन्न प्रकार और गुणों के कारण, सकारात्मक प्रेरकों और जांचों की एकाग्रता और ऊष्मायन समय को प्रयोग की आवश्यकताओं के अनुसार उचित रूप से समायोजित किया जा सकता है।

2. परख की सटीकता में हस्तक्षेप से बचने के लिए नमूनों को कार्बनिक सॉल्वैंट्स या लिपिड को प्रभावित करने वाले अन्य घटकों के संपर्क से बचना चाहिए।

3. फ्लोरोसेंट रंग शमन के अधीन हैं, और इस प्रक्रिया को प्रकाश से संरक्षित किया जाना चाहिए।

4. अपने स्वास्थ्य और सुरक्षा के लिए, कृपया ऑपरेशन के दौरान लैब कोट और दस्ताने पहनें।

 

केवल अनुसंधान उपयोग के लिए!

 

 

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