एटीपी ल्यूमिनसेंस सेल व्यवहार्यता परख किट

 

प्रोडक्ट का नाम	बिल्ली। नहीं.	विशेष.
एटीपी ल्यूमिनसेंस सेल व्यवहार्यता परख किट	G1612-100T	10 एमएल
	G1612-1000T	100 एमएल

 

 

एटीपी कोशिका में एक महत्वपूर्ण ऊर्जा अणु है जो कोशिका की विभिन्न शारीरिक और जैव रासायनिक गतिविधियों में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है, और जीव में ऊर्जा मुद्रा के रूप में जाना जाता है। सेलुलर स्थिति और सेल संख्या एटीपी के साथ सहसंबंध दर्शाती है। इसलिए, सेल संख्या या व्यवहार्यता का आकलन एटीपी के सापेक्ष स्तर से किया जा सकता है।

यह किट प्रतिदीप्ति उत्पन्न करने के लिए ल्यूसिफेरिन को उत्प्रेरित करने वाले एटीपी-निर्भर ल्यूसिफेरेज के सिद्धांत पर आधारित है, जो इंट्रासेल्युलर एटीपी स्तर का प्रभावी ढंग से पता लगा सकता है और मूल्यांकन कर सकता है। सीसीके-8 और एमटीटी जैसी पारंपरिक विधियों की तुलना में, प्रतिदीप्ति विधि में उच्च संवेदनशीलता और विस्तृत श्रृंखला के फायदे हैं।

 

 

सूखी बर्फ के साथ जहाज; 12 महीने तक प्रकाश से -80 डिग्री दूर रखें; प्रकाश से -20 डिग्री दूर स्टोर करें, 6 महीने के भीतर उपयोग के लिए अनुशंसित।

 

 

अवयव	G1612-100T	G1612-1000T
एटीपी ल्यूमिनसेंस सेल व्यवहार्यता परख किट	10 एमएल	100 एमएल
नियमावली	1 पीसी

 

 

1. सेल प्री-प्रोसेसिंग कार्य:कोशिकाओं को एक निश्चित घनत्व पर 96- वेल प्लेट में टीका लगाएं (कृपया सेल कल्चर के लिए उपयुक्त एक सफेद अपारदर्शी वेल प्लेट चुनें या नियमित सेल कल्चर प्लेट का उपयोग करें। पता लगाने के दौरान, समाधान को सफेद डिटेक्शन वेल में स्थानांतरित करें निकटवर्ती कुओं के बीच हस्तक्षेप को कम करें।) और प्रयोग के उद्देश्य के अनुसार कोशिकाओं का पूर्व-उपचार करें;

2. एटीपी मानकों के लिए नमूना तैयार करना (वैकल्पिक):एटीपी मानक (स्वयं निहित) को धीरे-धीरे पीबीएस या बेसल माध्यम जैसे बफर के साथ पतला किया जाता है और 100 μL/वेल पर वेल प्लेट में जोड़ा जाता है;

3. सेल व्यवहार्यता परख:

3.1. एटीपी ल्यूमिनसेंस सेल विएबिलिटी परख अभिकर्मक को पहले से निकाल लें, इसे पिघलाएं और कमरे के तापमान पर लौटा दें;

3.2. सेल कल्चर प्लेट को हटा दें और कमरे के तापमान पर 5-10 मिनट के लिए संतुलित करें;

3.3. एटीपी ल्यूमिनसेंस सेल विएबिलिटी परख अभिकर्मक को 100 μL/वेल पर सीधे वेल प्लेट में जोड़ा जाता है;

3.4. 1-2 मिनट तक क्षैतिज रूप से हिलाएं या मिश्रण करने के लिए टैप करें;

3.5. 3 मिनट तक खड़े रहने के बाद, केमिलुमिनसेंस परख एक ल्यूमिनोमीटर, एक केमिलुमिनसेंस डिटेक्शन मॉड्यूल के साथ एक बहुक्रियाशील एंजाइम लेबलर, या बायोलुमिनसेंस का पता लगाने में सक्षम अन्य उपकरणों का उपयोग करके किया जा सकता है (ध्यान दें: नमूना स्वयं प्रतिदीप्ति विधि में प्रकाश उत्सर्जित नहीं करता है, लेकिन इसकी आवश्यकता होती है) उत्तेजना प्रकाश की एक विशिष्ट तरंग दैर्ध्य से उत्तेजित होना और फिर एक विशेष चैनल के माध्यम से प्राप्त होना। केमिलुमिनसेंस में, नमूना स्वयं प्रकाश उत्सर्जित करता है और उसे किसी विशिष्ट तरंग दैर्ध्य द्वारा उत्तेजित होने की आवश्यकता नहीं होती है। संबंधित उपकरण द्वारा पता लगाने के लिए उत्तेजना प्रकाश की तरंग दैर्ध्य);

4. डेटा विश्लेषण:निम्नलिखित डेटा विश्लेषण पृष्ठभूमि रिक्त को घटाने पर आधारित है

4.1. सापेक्ष कोशिका संख्या (प्रसार) विश्लेषण: प्रतिदीप्ति तीव्रता मान के अनुसार, कोशिकाओं की संख्या निर्धारित करें।

4.2. सेल व्यवहार्यता गणना (सेल प्रसार व्यवहार्यता या साइटोटोक्सिसिटी व्यवहार्यता):

टिप्पणी:

ए (खुराक समूह): उपचारित कोशिकाएं + एटीपी ल्यूमिनेसेंस सेल व्यवहार्यता परख अभिकर्मक

A1 (कोई खुराक समूह नहीं): सामान्य अनुपचारित कोशिकाएं + एटीपी ल्यूमिनेसेंस सेल व्यवहार्यता परख अभिकर्मक

ए0 (रिक्त नियंत्रण समूह): सेल कल्चर माध्यम (कोई सेल नहीं) + एटीपी ल्यूमिनेसेंस सेल व्यवहार्यता परख अभिकर्मक

4.3. एटीपी सामग्री का मात्रात्मक विश्लेषण (वैकल्पिक):

4.3.1. ज्ञात एटीपी मानक वक्र के प्रतिदीप्ति तीव्रता मान को रिक्त नियंत्रण समूह के प्रतिदीप्ति तीव्रता मान डेटा से घटाया जाता है, और मानक वक्र को एक्सेल जैसे सॉफ़्टवेयर का उपयोग करके प्लॉट किया जाता है, और सूत्र प्राप्त किया जाता है:

जहां a ढलान का प्रतिनिधित्व करता है और b अवरोधन का प्रतिनिधित्व करता है।

4.3.2. परख प्रणाली में एक्स-वैल्यू (एटीपी सामग्री) की गणना सूत्र के अनुसार की जाती है:

उपरोक्त समीकरण में 4.3.1 से ढलान ए और इंटरसेप्ट बी को प्रतिस्थापित करके वाई के मूल्य की गणना करें।

4.3.3. नमूनों में एटीपी सामग्री की गणना:

 

1. यह सुनिश्चित करने के लिए कि परीक्षण अभिकर्मक का प्रभावी ढंग से उपयोग किया जाता है, इसे छोटे भागों में संग्रहीत करने और बार-बार जमने और पिघलने से बचने की सिफारिश की जाती है।

2. परीक्षण डेटा की सटीकता सुनिश्चित करने के लिए परीक्षण समय वार्प को 5-30 मिनट के भीतर नियंत्रित किया जाता है।

3. विगलन के बाद अभिकर्मक वर्षा का हिस्सा, एक सामान्य घटना है, इसके पूर्ण विघटन को सुनिश्चित करने के लिए उपयोग से पहले पूरी तरह से हिलाया जाता है।

4. प्रकाश से बचने का प्रयास करें और थोड़े समय के भीतर परीक्षण अभिकर्मकों को जोड़ें। नमूने जोड़ने के लिए मल्टीवेल पिपेट का उपयोग करने और पिपेट के प्रत्येक कुएं में पिपेटिंग मात्रा की स्थिरता पर ध्यान देने की सिफारिश की जाती है।

5. अपने स्वास्थ्य और सुरक्षा के लिए, कृपया ऑपरेशन के दौरान लैब कोट और दस्ताने पहनें।

 

केवल अनुसंधान उपयोग के लिए!

 

 

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